| 如何寻找miRNA的靶基因？ | 发布人：境象生物 |
| miRNA的靶基因的确定，需要通过计算机预测和实验验证两个步骤。 计算机预测： 通过几大数据库（miRanda、PicTar、TargetScan等），在同一物种所有基因的3’UTR区域筛选miRNA互补序列，从而给出可能是该miRNA靶基因的一个基因集合。 实验验证： A.表达谱分析：在体外细胞中加入miRNA抑制剂（inhibitors）或拮抗剂（antagomir），然后对计算机预测的基因集合进行表达谱分析，同时设置未经过处理的对照组，找出表达有差异的基因，初步确定miRNA靶基因。 B.进一步验证：将初步确定的miRNA靶基因3’UTR区序列克隆，找出与miRNA互补的miRNA靶序列。构建一个含有miRNA基因、靶序列、报道基因的质粒，靶序列应在报道基因的表达调控区域。将其转染到细胞内，同时设置对照组，观察报道基因的表达情况，进一步验证miRNA的靶序列。 |
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