| 什么是基于荧光探针的实时荧光PCR？ | 发布人：境象生物 |
| 实时荧光PCR的根本奥妙在于将PCR扩增与荧光信号的变化联系在一起，这样可以通过荧光信号的变化检测PCR的扩增。基于荧光探针的实时荧光PCR，在反应体系中引入了荧光标记的探针而将PCR扩增与荧光信号联系在一起。以Taqman 探针为例，在Taqman 探针的5‘端和3’端分别标记了荧光报道基团和淬灭基团。完整的Taqman探针因为3‘端淬灭基团的存在，5’端荧光基团没有荧光。在PCR过程DNA复性这一步，探针与模板杂交配对，形成DNA双链。当DNA聚合酶行至探针模板双链时，DNA聚合酶的5‘外切酶活性将报道基团切断，导致报道基团与淬灭基团的分离， 这时报道基团发出荧光。这样就实现了PCR扩增与荧光信号的关联。 | |