microRNA InstantPCR定量试剂
miRNA是一类大小约为22个碱基的小RNA分子。它们在转录后阶段对基因表达进行调控。调控机制是通过与靶基因的mRNA互补序列结合，抑制蛋白质的翻译或降低mRNA的稳定性，从而抑制靶基因的表达。miRNA在细胞的发育，分化，生长等生命活动中起着重要调控作用。境象生物miRNA定量产品采用SYBR GreenI实时荧光PCR进行准确定量。我们提供人，小鼠和大鼠已经经过实验验证的miRNA定量试剂盒。如需对其它物种的miRNA定量，请与我们联系，我们提供定制服务。
产品特点
图1:hsa-miR-138-5P 9个梯度+NTC扩增曲线、线性关系、熔解曲线。模板在PCR体系中的量分别为4.3x109-4.3 x10 copies，0 copies（10倍梯度稀释，10个梯度）。A1和B1由于浓度过高，扩增曲线偏后，Ct值略偏低，A2-A9和B2-B9线性范围良好，A1-A9，B1-B9熔解曲线全部单峰，两组NTC均未扩增。
图2：15个miRNA中有10个可以检测到最低浓度（43个拷贝）的目标miRNA,8-9个梯度的线性关系良好， NTC未扩增或极少扩增，反转录引物的本底Ct值全部＞35。
图3: 在miRNA浓度达到4x107的情况下，8个相似miRNA用各自对应的反转录引物反转录后，用不同的PCR引物进行交叉试验，扩增结果ct值取2-△ct（交叉组/不交叉组），例：(sl-7a andPCR-7b) / (sl-7a andPCR-7a)。结果显示：除Sl-7a和PCR引物7a外，其他引物均没有交叉扩增。
miRNA定量原理
境象生物采用当今基因定量的金标准——实时荧光PCR对miRNA进行定量检测。根据需要定量的miRNA个数，采用两种方法对miRNA进行反转录和定量。
独创的microRNA定量PCR检测技术——双端延长技术
境象生物独创的microRNA检测“双端延长”技术，同时延长目标microRNA的5’和3’端，并为每个目标序列设计专一性的PCR引物， 5’专一性引物跨越延长序列和目标序列衔接部分，3’专一性引物跨越目标序列和延长序列衔接部分，从而保证了microRNA检测的灵敏度、专一性和低本底。
产品组成
qPCR引物- SYBR MasterMix
- 产品使用说明书
提醒：试剂盒不包含反转录试剂。由于独特的设计，境象生物miRNA定量试剂盒不与其它公司反转录试剂盒兼容，反转录请使用境象生物miRNA反转录试剂盒。